Εισαγωγικά στοιχεία - Προετοιμασία και χειρισμός των πρωτεϊνικών δειγμάτων

Abstract

Κάθε πρωτεΐνη ανάλογα με το ιδιαίτερο φυσικοχημικό της προφίλ, πιθανόν να έχει ειδικές απαιτήσεις όταν απομακρύνεται από το φυσιολογικό βιολογικό περιβάλλον της και υπόκειται σε βιοχημική ανάλυση. Αν αυτές οι απαιτήσεις δεν ικανοποιούνται , η πρωτεΐνη μπορεί να χάσει την ικανότητά της να εκτελεί συγκεκριμένες λειτουργίες. Έτσι, ο καθορισμός αυτών των απαιτήσεων είναι συχνά ένα κύριο εμπόδιο για την ανάλυση και το χαρακτηρισμό- κατηγοριοποίηση των πρωτεϊνών. Σε κάποιες περιπτώσεις, η δυσκολία έγκειται στη σταθεροποίηση της πρωτεΐνης έναντι της εξωτερικής πρωτεόλυσης, ενώ σε άλλες περιπτώσεις το πρόβλημα βρίσκεται στη διατήρηση των προσδετών ή της ενζυμικής δραστηριότητας. Σε κάθε περίπτωση, το περιβάλλον ανάλυσης και χειρισμού, η ορθή παρασκευή και συντήρηση των κατάλληλων διαλυμάτων επεξεργασίας και η επιλογή της αναλυτικής μεθόδου, επηρεάζουν καθοριστικά την επιτυχή έκβαση κάθε πειράματος ανάλυσης και ταυτοποίησης πρωτεϊνικών δειγμάτων.

Each protein, depending on its unique physicochemical profile, may have specific requirements when removed from its normal biological environment and subjected to biochemical analysis. If these requirements are not met, the protein may lose its ability to perform specific functions. Thus, determining these requirements is often a major hurdle for the analysis and characterization of proteins. In some cases, the difficulty lies in stabilizing the protein against external proteolysis, while in others, the challenge is maintaining binding or enzymatic activity. In every case, the analysis and handling environment, proper preparation and maintenance of appropriate processing solutions, and the choice of analytical methods significantly influence the successful outcome of each protein analysis and identification experiment.