Ανάλυση πρωτεϊνών

Abstract

To παρόν κεφάλαιο έχει ως σκοπό να βοηθήσει τον φοιτητή να κατανοήσει τις βασικές μεθοδολογίες που εφαρμόζονται σε ένα βιοχημικό εργαστήριο για τον ποιοτικό και ποσοτικό προσδιορισμό πρωτεϊνών σε βιολογικά δείγματα. Αρχίζει με την περιγραφή των συνηθέστερων τρόπων απομόνωσης και ποσοτικού προσδιορισμού του συνόλου των πρωτεϊνών από τα βιολογικά δείγματα και συνεχίζεται με την παρουσίαση των σημαντικότερων μεθόδων διαχωρισμού πρωτεϊνών. Ένα σημαντικό μέρος του κεφαλαίου αφιερώνεται στην παρουσίαση μεθοδολογιών για τον χαρακτηρισμό των πρωτεϊνών όσον αφορά την εύρεση του μοριακού βάρους και τον χαρακτηρισμό της πρωτοταγούς, δευτεροταγούς, τριτοταγούς και τεταρτοταγούς δομής. Γίνεται εκτενής αναφορά σε ανοσολογικές τεχνικές ανάλυσης, στην εφαρμογή της φασματομετρίας μάζας στην ανάλυση και χαρακτηρισμό πρωτεϊνών, ενώ ειδική αναφορά γίνεται στην ανάλυση των μεταλλοπρωτεϊνών.

Mass spectrometry is arguably one of the most versatile analytical techniques available to scientists today. It is used in nearly every branch of chemistry—organic, inorganic, physical, and analytical—as well as in biochemistry, biology, medicine, and materials science. Mass spectrometry is employed in both qualitative and quantitative analysis and is an essential tool in biochemical research for characterizing a wide variety of macromolecules, including carbohydrates, proteins, lipids, and oligonucleotides. In recent years, mass spectrometry has seen spectacular advancements in technological innovation and the breadth of its applications. This chapter presents the fundamental aspects of the technique, including its basic components, principles, and analytical methods. Additionally, the chapter discusses the specific needs of biochemical analysis and how mass spectrometry addresses these requirements.